抗博尔纳病病毒磷蛋白单克隆抗体的制备及鉴定

摘要：

目的 以重组的博尔纳病病毒(BDV)磷蛋白(p24)为免疫原制备单克隆抗体,并鉴定其特异性.方法 以纯化后的重组BDVp24免疫小鼠,将骨髓瘤细胞与其脾细胞进行融合,经ELISA法筛选出分泌抗p24单抗的细胞株,并对其进行克隆与亚克隆培养,将最终获得的其中2株细胞株分别注入小鼠腹腔制备单抗,经亲和纯化法纯化后,采用ELISA法测定效价,利用蛋白免疫印迹和免疫荧光鉴定其特异性.结果 建立了2株稳定分泌抗p24单抗的杂交瘤细胞株,抗体亚类均为IgG1型.纯化后的腹水抗p24单抗纯度为98％和93％,ELISA效价在1∶81 000以上,该抗体均能识别重组p24蛋白和BDV感染人类少突胶质细胞(Oligodendroglia cell,OL细胞)所表达的p24蛋白.结论 成功制备了灵敏性高、特异性好的抗BDVp24单抗,为博尔纳病病毒诊断方法的研制及感染机理的研讨提供依据.

关键词：博尔纳病病毒、磷蛋白类、单克隆抗体

所属期刊栏目：33

分类号：R392

资助基金：国家重点基础研究发展计划973计划,No.2009CB918300Supported by the National Basic Research Program of China 973 Program,Grant 2009CB918300

在线出版日期：2017-11-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：779-783