RNA恒温扩增实时检测技术快速鉴定偶发分枝杆菌的研究

摘要：

目的 建立RNA恒温扩增实时检测技术快速鉴定偶发分枝杆菌(RIARD-MF)的方法,评估其在鉴定分枝杆菌临床分离株中的应用效果.方法 将偶发分枝杆菌的16S rRNA特异序列作为目的靶标进行检测,设计含T7启动子逆转录扩增引物和RNA探针,分别对5种非分枝杆菌细菌、20种分枝杆菌标准株和259株临床分枝杆菌分离株进行42℃恒温扩增实时检测,参考标准为PCR基因测序结果.结果 RIARD-MF方法学检测灵敏度可达60 CFU/mL.在25种细菌的RIARD-MF特异性检测中:只有偶发分枝杆菌检测结果为阳性,其余24种细菌均为阴性,与测序检测结果一致.在检测分枝杆菌临床分离菌株时,RIARD-MF鉴定偶发分枝杆菌5株,其余为非偶发分枝杆菌,与测序结果一致,检测灵敏度和特异度均为100％.结论 RIARD-MF鉴定偶发分枝杆菌具有较高的特异度、灵敏度和准确性,且检测快速,有望成为一种新的偶发分枝杆菌临床分离菌株鉴定方法.

关键词：RNA恒温扩增、鉴定、偶发分枝杆菌

所属期刊栏目：33

分类号：R378.91(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：国家十二五传染病重大专项课题2013ZX10003001-003;上海市自然基金课题17ZR1423400Funded by the National Twelfth Five-year Major Subject of Infectious Diseases2013ZX10003001-003;the Shanghai Municipal Natural Science Foundation17ZR1423400

在线出版日期：2017-11-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：763-767,773