新城疫病毒核蛋白单克隆抗体的制备及双抗体夹心ELISA的初步建立

摘要：

目的 制备新城疫病毒(NDV)核蛋白(NP)的单克隆抗体(单抗),并用于建立一种可定量检测NDV病毒含量的双抗体夹心酶联免疫吸附试验检测方法(NDV NP ELISA).方法 基于NDV病毒株F48E9获得NP基因,经原核表达方式制备出重组抗原rNP;免疫小鼠制备NDV NP特异性单抗;单抗经HRP标记和配对筛选,建立NDV NP ELISA,分析其特异性、灵敏度、精密度、准确度和检测线性,并分析本方法定量检测的NP含量与PFU病毒滴度的定量相关性.结果 建立基于单抗3C10和4E7的NDV NP ELISA,其定量检测NDV rNP的最佳线性范围为0.015～0.250 μg/ml(R2=0.9974),回收率在88.4％～106.01％,变异系数小于3.4％;该方法具有良好特异性;该方法定量检测NDV抗原含量与PFU病毒感染滴度有较好的相关性(R2 =0.9209).结论 建立NDV NP ELISA,可准确定量检测NDV病毒中的NP抗原含量,为NDV病毒含量的测定提供一种可靠简便的分析方法.

关键词：新城疫病毒、核蛋白、单克隆抗体、定量检测、酶联免疫吸附测定

所属期刊栏目：33

分类号：R372(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：国家自然科学基金31670934:基于广谱中和单抗的通用型流感疫苗设计及其结构基础研究 Supported by the National Natural Science Foundation of China Grant No.31670934:The design of universal influenza vaccine based on broadly neutralizing monoclonal antibody and its structural study

在线出版日期：2017-08-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：481-485,512