弓形虫表面抗原SAG1基因自杀性DNA疫苗的构建及免疫原性检测

摘要：

目的 构建表达弓形虫表面抗原SAG1的自杀性DNA疫苗pDREP-SAG1并检测其免疫原性.方法 以弓形虫RH株基因组DNA为模板,PCR扩增SAG1基因(GenBank No.HM776940.1),克隆至甲病毒复制子载体pDREP-eGFP中替换原有的eGFP基因,菌液PCR、双酶切及测序鉴定重组质粒.重组的自杀性DNA疫苗pDREP-SAG1经股四头肌注射并联合瞬时电穿孔免疫BALB/c小鼠,同时以原质粒pDREP-eGFP作为对照组,间隔3周后以相同条件再免疫1次,收集小鼠血清,以弓形虫裂解抗原Western blotting检测其诱导产生的特异性抗体.结果 从弓形虫基因组中PCR扩增得到1 011 bp长度的SAG1基因,成功构建重组质粒pDREP-SAG1.Western blotting结果显示,重组质粒免疫的小鼠血清能特异性地识别虫体抗原中的SAG1抗原.结论 成功构建了弓形虫自杀性DNA疫苗pDREP-SAG1,能诱导小鼠产生特异性的抗体,具有免疫原性.

关键词：弓形虫、SAG1、自杀性DNA疫苗

所属期刊栏目：32

分类号：R382.5(医学寄生虫学)

资助基金：the Commonweal Project of Science and Technology Department of Zhejiang Province2014C33161;the Commonweal Project of Science and Technology Department of Wenzhou CityY20140665;as well as College Students Science and Technology Project and Xinmiao Talents Program of Zhejiang Province2015R413061;浙江省科技厅公益技术研究社会发展项目2014C33161;温州市科技局公益项目Y20140665;浙江省大学生科技创新活动计划暨新苗人才计划项目2015R413061

在线出版日期：2016-12-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：885-888,892