活化TLR9的牛种布氏菌基因外重复回文序列筛选及活性检测

摘要：

目的 筛选具有活化Toll样受体9(TLR9)的牛种布氏菌基因外重复回文序列(Repetitive Extragenic Palin-drome Squence,REPs)并检测其活性,为布氏菌病的治疗提供新思路.方法 基于Brucella abortus A13334基因组序列,利用生物信息学技术识别其REPs后,合成序列.将合成的天然骨架的脱氧寡核苷酸(ODNs)转染小鼠单核巨噬细胞株RAW264.7,以ELISA检测IFN-α的分泌水平.采用TLR9-siRNA沉默RAW264.7中的TLR9,将上述诱导IFN-α分泌增加的阳性ODN序列转染RAW264.7,ELISA方法检测IFN-α的分泌变化.结果 筛选出1857条牛种布氏菌REPs,选择2级茎环结构较好的5条ODNs序列进行合成,ELISA方法检测显示ODNs M4、M5介导IFN-α分泌量显著高于阴性对照(P＜0.05),且阳性ODN M5所介导的IFN-α分泌可以被TLR9-siRNA显著抑制.结论 布氏菌基因组中存在可以活化TLR9信号通路的REPs,此结果有助于对布氏菌致病和免疫机制的认识.

关键词：牛种布氏菌、基因外重复回文序列、巨噬细胞、Toll样受体9、α-干扰素

所属期刊栏目：32

分类号：R183.7(流行病学与防疫)

资助基金：国家自然科学基金81360242;内蒙古杰出青年培育基金2014JQ04;内蒙古自治区自然科学基金2014MS0808,2015MS0810;the the Natural Science Foundation of China81360242;China National Funds for Distinguished Young Scientists2014JQ04;the Natural Science Foundation of Inner Mongolia.2014MS0808,2015MS0810

在线出版日期：2016-06-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：447-450