LAMP法检测儿童粪便中肠道腺病毒的建立

摘要：

目的 通过应用环介导等温扩增(LAMP)建立一种快速、简便的可视化检测儿童肠道腺病毒核酸的方法.方法 登录GenBank网站下载腺病毒40和41基因型的六邻体序列,根据该区段的保守序列设计4条LAMP引物.将反应体系加入EP管,在恒温条件(65℃)扩增60 min后,再以凝胶电泳和钙黄绿素染色评价LAMP法的特异性和灵敏度,并和PCR法的结果相比较.最后,同时用LAMP和PCR法对40份可疑临床样本进行检测,应用卡方检验进行统计学分析.结果 LAMP法能准确地使腺病毒40和41型得到扩增,酶切结果也正确,显示了LAMP法较好的特异性.LAMP的灵敏度比PCR高约10倍.经过对40份临床样本的检测,LAMP与PCR均没有发生非特异扩增,LAMP法和PCR法的一致性为92.5％(P＞0.05)且LAMP法没有漏检阳性样本.另外,使用钙黄绿素染色的方法更好地显示了产物检测的可视性和简便性.结论 该研究初步建立了快速、简便、可视化检测肠道腺病毒的LAMP技术,在基层医疗机构有一定的实用价值.

关键词：肠道腺病毒、环介导等温扩增(LAMP)、儿童

所属期刊栏目：32

分类号：R373(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：全军医药卫生科研基金项目No.CBJ14C010资助 Supported by the Medicine and Hygiene Research Foundation of the Whole Army CBJ14C010

在线出版日期：2016-08-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：124-127