猪链球菌细胞壁蛋白SSU05_1000的表达、纯化及活性分析

摘要：

目的 构建猪链球菌细胞壁蛋白SSU05_1000基因的重组表达质粒,在大肠杆菌BL21(DE3)中高效表达,并研究其对细胞间紧密连接的调控作用.方法 以05ZYH33基因组为模板设计引物,构建pET30a-SSU05_1000重组表达质粒,转化到大肠杆菌中诱导表达,用镍亲和层析的方法对目的蛋白进行纯化,Western blot检测其对人脑微血管内皮细胞紧密连接的调控.结果 构建的SSU05_1000重组表达质粒能够在大肠杆菌中高效表达,纯化的SSU05_1000蛋白纯度达90％以上,Western blot结果显示其与人脑微血管内皮细胞(hCMEC/D3)相互作用后,可以下调细胞间紧密连接蛋白Claudin-5的表达.结论 SSU05_1000蛋白能够破坏人脑微血管内皮细胞的紧密连接结构,提示其在猪链球菌穿血脑屏障(BBB,bloodbrain barrier)过程中起重要作用.

关键词：猪链球菌、SSU05_1000、紧密连接

所属期刊栏目：29

分类号：R378(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：the National Natural Science Foundaion of China81171528;国家自然科学基金项目81171528

在线出版日期：2013-10-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：757-761