天蚕素多肽分子对大肠埃希菌的抑制作用

摘要：

目的 体外重组表达家蝇天蚕素成熟肽分子,观察其对临床分离的多重耐药大肠埃希菌(E.coli)体外抑制作用.方法 PCR克隆天蚕素成熟肽(Mature Cecropin,MC)基因,在MC基因前加入色氨酸密码子(TGG)连接于pET32a质粒的硫氧还蛋白基因后,构建重组质粒pET32a-MC.转化E.coli/BL21(DE3)中.IPTG诱导重组融合蛋白质Thioredoxin(硫氧还蛋白,Trx)-MC表达.融合蛋白质纯化后,经胃蛋白酶37 ℃水解.融合蛋白质中的天蚕素氨基酸序列具有抗胃蛋白酶能力不被水解,融合蛋白质其余部分被胃蛋白酶水解成小于2 kD的碎片,使用透析袋分离、纯化、浓缩,获得天蚕素成熟肽分子.水解产物经Tricine-SDS-PAGE验证,获得一条与天蚕素分子大小相近的条带.采用液态生长抑制试验检验天蚕素分子对E.coli抑制作用,观察其对标准菌株ATCC 25922及临床分离多重耐药菌株的抑制活性.结果 MC成熟肽分子体外对E.coli标准菌株的抑制活性较强,标准菌株较多重耐药菌株受抑制得更快,但两者均能被天蚕素分子抑制.结论 天蚕素多肽分子对E.coli多重耐药菌株具有抑制作用.

关键词：天蚕素、伴侣分子、融合表达、抑菌试验、多重耐药菌

所属期刊栏目：29

分类号：R378.2(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

在线出版日期：2013-07-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：533-536