酵母双杂交技术筛选与HBeAg结合的胰腺细胞蛋白

摘要：

目的 应用酵母双杂交技术筛选人类胰腺细胞cDNA文库中与HBeAg相互作用的结合蛋白.方法 醋酸锂法将诱饵质粒pGBKT7-HBeAg转化酵母菌AH109;同时扩增纯化人胰腺细胞cDNA文库并转化酵母菌株Y187.应用酵母双杂交系统3将二者进行配合,在四缺培养基(SD/-Trp/-Leu/-His/-Ade)和X-α-gal上进行双重筛选.提取阳性菌落质粒并电击转化感受态大肠埃希菌DH5α,BglⅡ酶切鉴定及与诱饵质粒的共转化回交实验验证,将阳性克隆测序并在GenBank里进行同源性比对和生物信息学分析.结果 初步筛选出包括顺乌头酸酶在内的13个与HBeAg相互作用的蛋白.结论 HBeAg可能与胰腺文库蛋白相互作用,与2型糖尿病和肝脏脂肪变性等代谢性疾病密切相关.

关键词：乙型肝炎病毒e抗原、胰腺细胞、酵母双杂交、代谢综合征

所属期刊栏目：28

分类号：R373.2(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：淮南市指导性科技计划项目2011B38

在线出版日期：2012-10-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：927-931