幽门螺杆菌抗原基因ureB在乳酸菌中的克隆表达与免疫反应性研究

摘要：

目的 为了开发幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)口服疫苗,将Hp尿素酶B(UreB)在食品级乳酸乳球菌NZ3900菌株中进行表达,并研究其免疫反应性.方法 PCR扩增HpMEL-HP27菌株ureB基因(基因号:FJ436980),将其克隆入大肠杆菌-乳酸乳球菌穿梭质粒pNZ8110中并转化乳酸乳球菌NZ3900；采用正交试验确定目的蛋白表达的适宜条件;应用western-blot鉴定其免疫反应性.结果 成功扩增了HpMEL-HP27菌株ureB基因,构建了ureB基因的乳酸菌NICE( Nisin-cont rolled expression)原核表达系统；UreB蛋白适宜的表达条件为:在ureB重组菌生长至对数生长前期(OD600≈0.3～0.4)加入终浓度为40ng/mL的nisin,诱导表达5h,可溶性UreB蛋白表达量最高,可达27.26μg/mL培养基.可溶性UreB蛋白的表达占上清蛋白的比例最高可达20.19％；Western-blot结果显示乳酸乳球菌表达的UreB抗原蛋白具有良好的免疫反应性.结论 结果提示应用乳酸乳球菌构建幽门螺杆菌食品级疫苗可能具有较好前景.

关键词：幽门螺杆菌、乳酸乳球菌、NICE、UreB

所属期刊栏目：27

分类号：R378(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

在线出版日期：2011-12-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：925-928,932