SYBR Green荧光PCR检测美洲钩虫方法的建立

摘要：

目的 建立荧光定量PCR检测美洲钩虫的方法.方法 提取虫体基因组DNA、根据GenBank中美洲钩虫ITS-2序列设计特异引物,PCR扩增ITS-2序列、克隆、测序和比对.常规PCR检验引物特异性.将ITS-2序列扩增产物回收、纯化后经T克隆转入大肠埃希菌DH5α,提取重组质粒,鉴定后作为标准品模板建立荧光定量PCR标准曲线,并做灵敏性和重复性试验.结果 构建的荧光定量PCR标准曲线循环阈值与模板浓度呈良好的线性关系,溶解曲线的吸收峰单一,实验重复性良好.结论 成功构建了SYBR Green I荧光定量PCR检测美洲钩虫的方法,可用于快速、准确、定量检测美洲钩虫.

关键词：美洲钩虫、rDNA ITS-2序列、荧光定量PCR、SYBR Green I

所属期刊栏目：26

分类号：R383.1(医学寄生虫学)

资助基金：福建省医学创新基金2009-CXB-67;厦门市科技基金3502Z20094021;福建省科技项目2008N2005

在线出版日期：2011-03-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：1110-1113