应用LAMP技术鉴定含89K毒力岛2型猪链球菌菌株

摘要：

目的 应用LAMP(Loop-Mediated Isothermal Amplification)技术鉴别含89K毒力岛2型猪链球菌(Streptococcus suis serotype 2,S.suis 2)菌株.方法 根据S.suis 2中国分离株(05ZYH33)89K毒力岛中基因序列设计4条引物(2条内引物、2条外引物);应用LAMP,对21株S.suis 2、18株其它链球菌、9株葡萄球菌、5株其它菌株及49份未知样本进行检测,并对LAMP的最低检测限进行测试,结果通过肉眼目测或电泳检测,并将结果与PCR/定量PCR结果比较.结果 该方法仅对含89K毒力岛的中国S.suis 2特有株检测为阳性,而其它菌株经LAMP检测均为阴性,试验表明本方法特异性好,其最低检测限为24CFU/反应,无需特殊设备,结果通过肉眼即可判断,从菌株核酸的提取至检测完成仅需2h左右.应用本方法对49份不同来源样本进行实际考核,其中32份不明发热病人呼吸道咽拭子应急样本及15份正常猪扁桃体咽拭子样本经检测89K毒力岛基因均为阴性,2份疑似SS2病人血液应急样本中一份检测到该毒力岛基因,该结果与普通PCR/定量PCR检测结果一致.结论 成功建立了检测S.suis 2 89K毒力岛的LAMP方法,该方法特异性好,操作简便,无需特殊的仪器设备,操作简单方便,极适合在我国广大基层实验室(包括基层医院/动物检疫等部门)开展应用.

关键词：89K毒力岛基因、猪链球菌2型、改良LAMP技术、鉴定检测

所属期刊栏目：26

分类号：R378.1(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：浙江省医药卫生科学研究基金2008A029

在线出版日期：2010-09-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：659-662,667