实时定量PCR检测siRNA对小鼠巨噬细胞中FTH1基因表达的抑制作用

摘要：

目的 通过实时定量 PCR(real-time PCR)检测基因表达的mRNA,建立一种直接观察小干扰RNA(siRNA)抑制目的 基因表达的方法.方法 化学设计合成对应于FTH1 (ferritin heavy chain 1, FTH1)基因表达mRNA的siRNA,经TurboFectTM in vitro Transfection Reagent转染小鼠RAW264.7巨噬细胞,48h后,提取总RNA,逆转录为cDNA.以3-磷酸甘油醛脱氢酶 (glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,GAPDH)为内参,定量检测FTH1的表达,比较干扰前后FTH1基因mRNA的量.结果 3种siRNA处理的小鼠巨噬细胞中FTH1基因的表达抑制率最高为97.60%.结论 实时定量PCR方法的建立为研究布鲁氏菌在侵染巨噬细胞过程中FTH1的功能提供了有效途径.

关键词：实时定量PCR、siRNA、小鼠RAW264.7巨噬细胞、FTH1

所属期刊栏目：26

分类号：R378.5(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：国家自然科学基金30800813;兵团博士基金2009JC15;高层次人才科研启动资金专项RCZX200828;973项目2010CB530200

在线出版日期：2010-09-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：638-641