粪肠球菌心内膜炎抗原efaA蛋白的原核表达及纯化

摘要：

目的 原核表达纯化粪肠球菌心内膜炎抗原efaA蛋白,为粪肠球菌心内膜炎的致病机制研究及临床血清学诊断奠定基础.方法 从粪肠球菌中扩增efaA基因,相应酶切后,克隆到原核表达载体pET30a中,构建pET30a-efaA重组质粒.经BamhI、XhoI酶切及测序鉴定,将pET30a-efaA质粒转化入BL21(DE3).以IPTG诱导BL21(DE3)表达efaA融合蛋白,亲和层析纯化重组蛋白,SDS-PAGE、Western Blot分析鉴定.结果 PCR体外扩增efaA基因产物约943bp,重组表达质粒pET30a-efaA在大肠杆菌BL21(DE3)中表达,通过亲和层析获得纯化重组蛋白.SDS-PAGE、Western免疫印迹显示蛋白表达带的分子量约为34kd.结论 粪肠球菌心内膜炎抗原efaA蛋白在大肠杆菌BL21(DE3)中成功表达并纯化.

关键词：肠球菌、粪肠球菌心内膜炎抗原efaA、原核表达

所属期刊栏目：26

分类号：R379.1(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：福建省教育厅科技项目JA07094;福建省自然科学基金C0510008

在线出版日期：2010-04-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：168-170