大鼠源肺孢子菌p55基因片段真核表达质粒的构建及表达

摘要：

目的 构建大鼠源肺孢子菌抗原p55 基因片段真核表达质粒,并研究该质粒在真核细胞COS-7中的有效表达.方法 以含有p55全长基因的质粒为模板,通过PCR 扩增p55基因片段,克隆至pGEM-T 载体中,经酶切后再将p55基因重组至真核表达载体pcDNA3.1(+)中,构建重组真核表达质粒pcDNA3.1(+)-582,经限制性内切酶酶切分析及测序鉴定正确后,应用脂质体转染技术转染入COS-7细胞,RT-PCR 检测其基因转录情况,SDS-PAGE 鉴定其表达相应的目的蛋白质情况.结果 成功扩增了p55基因片段,酶切和测序证明正确构建了重组真核表达质粒pcDNA3.1(+)-582,RT-PCR 和SDS-PAGE 方法证实该片段能在COS-7细胞中有效表达目的蛋白质.结论 成功构建了大鼠源肺孢子菌p55基因片段的真核表达质粒载体,并在COS-7 细胞中表达,为进一步进行核酸疫苗的研究奠定了基础.

关键词：大鼠源肺孢子菌、p55基因、真核表达

所属期刊栏目：26

分类号：R382.9(医学寄生虫学)

资助基金：南通大学自然科学基金资助项目08Z044

在线出版日期：2010-03-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：25-28