口蹄疫病毒3D聚合酶多克隆抗体的制备与特性分析

摘要：

目的 表达口蹄疫病毒3D聚合酶,并制备兔抗3D多克隆抗体.方法 采用PCR方法扩增口蹄疫病毒(FMDV)3D聚合酶基因,经BamHⅠ和NdeⅠ双酶切后插入pET-30a(+)原核表达载体,构建的pET-3D重组表达质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)菌株,经IPTG诱导表达,SDS-PAGE鉴定目的蛋白的表达并提取包涵体,纯化目的蛋白.然后用纯化蛋白免疫新西兰大耳白兔制备多克隆抗体,以Western blot鉴定抗体特异性,并以间接ELISA方法测定其效价.结果 SDS-PAGE电泳分析显示,表达的目的蛋白约为46ku,与预期结果相符,制备的多克隆抗体效价达1:8000以上,且具有较高的特异性.结论 制备了具有高亲和性和特异性的3D聚合酶多克隆抗体,为3D聚合酶的生物学功能和抗原表位研究奠定了基础.

关键词：口蹄疫病毒、3D聚合酶、多克隆抗体

所属期刊栏目：26

分类号：S852.65(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家支撑计划项目2006BAD06A06

在线出版日期：2010-03-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：6-9