嗜水气单胞菌气溶素的纯化及其溶血特性分析

摘要：

目的 用亲和纯化法纯化嗜水气单胞菌气溶素,从单因子水平分析嗜水气单胞菌的溶血特性.方法 用嗜水气单胞菌气溶素单克隆抗体McAb 3C12B11为配体制备亲和层析柱,甘氨酸洗脱以获得纯化的嗜水气单胞菌ZN1气溶素.获得的纯化气溶素分别与1%欧洲鳗鲡血红细胞、1%兔血红细胞、1%羊血红细胞进行溶血特性分析,并利用单克隆抗体McAb 3C12B11进行溶血抑制试验.结果 经亲和纯化获得分子量约为51.7kDa的气溶素,该气溶素能在Western-blotting反应中被嗜水气单胞菌ZN1 胞外产物(ECPs)免疫血清和McAb 3C12B11所识别.溶血试验证实亲和纯化的ZN1气溶素和ZN1 ECPs对兔血红细胞、欧洲鳗血红细胞和绵羊血红细胞的溶血效价分别为5.12×104 HU/mg、3.20×103HU/mg、6.40×103 HU/mg和2.56×104HU/mg、1.28×104 HU/mg、3.20×103 HU/mg.溶血抑制试验结果 表明:当红细胞为1%兔血红细胞时,McAb 3C12B11对气溶素和ZN1 ECPs的溶血抑制效价均为1∶211 ;当红血细胞为1%欧洲鳗血红细胞时,McAb 3C12B11对气溶素的溶血抑制效价为1∶210,对ZN1 ECPs的溶血抑制效价仅为1∶23.结论 嗜水气单胞菌气溶素在单因子条件下与嗜水气单胞菌ECPs的溶血特性存在一定的差异,嗜水气单胞菌ZN1 ECPs中存在多种溶血性毒素,这些毒素对不同宿主的溶血能力存在差异,同一嗜水气单胞菌菌株对不同的宿主起主要作用的溶血性毒素不同.

关键词：嗜水气单胞菌、气溶素、亲和纯化、溶血

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分类号：R378(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：福建省自然基金项目2007J0057;国家863项目2006AA100308

在线出版日期：2009-06-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：422-425,433