肺炎支原体ORF6区基因的克隆与表达

摘要：

目的 表达肺炎支原体ORF6区基因,探索其作为诊断抗原的可能性.方法 采用PCR方法 ,从肺炎支原体FH株基因组中扩增ORF6区基因,用TA克隆的方法 克隆该片断,并以该重组质粒为模板,扩增ORF6区基因,此扩增产物经过双酶切后克隆到表达载体pET -32a(+)中,转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达后采用SDS-PAGE和Western-blotting检测重组质粒目的 蛋白的表达结果 .结果 获得肺炎支原体ORF6区基因长为1 003bp的DNA片段,SDS-PAGE 检测表达产物,在相对分子量56.8kDa处有阳性表达条带.免疫印迹显示,该蛋白带能与肺炎支原体阳性血清反应.结论 ORF6区基因在大肠杆菌中获得高效表达,重组蛋白具有免疫反应性.

关键词：肺炎支原体、ORF6区、基因、克隆、表达

所属期刊栏目：25

分类号：R375(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

在线出版日期：2009-06-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：414-417