用protein G纯化口蹄疫病毒单克隆抗体的特性分析

摘要：

目的 为了获得高效价和高纯度的O型口蹄疫病毒单克隆抗体.方法 用O型口蹄疫乳鼠毒(LD50=10-8.5)感染免疫小鼠,按有限稀释法和ELISA方法筛选出阳性杂交瘤细胞株,制备单抗腹水,所收腹水用50%和45%的饱和硫酸铵沉淀,再用protein G亲和层析柱进行亲和层析纯化单体,并用SDS-PAGE和单抗检测方法分析其纯化抗体的纯度和活性.结果 经3次亚克隆获得了一株杂交瘤细胞株(10E6),抗体亚类鉴定为IgG2a;SDS-PAGE电泳显示,纯化的抗体纯度较高,只有IgG2a的重链和轻链,而没有其它杂蛋白带;单抗ELISA检测方法显示,纯化的抗体具有良好的活性,其效价为1∶102 400,高于腹水效价.结论 用protein G亲和层析法获得了高纯度和高效价的单克隆抗体,将为O型口蹄疫病毒的基础研究和应用研究奠定基础.

关键词：O型口蹄疫病毒、单克隆抗体、链球菌G蛋白、亲和层析

所属期刊栏目：25

分类号：S852.65(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家科技支撑计划2006BAD06A14;2006BAD06A10

在线出版日期：2009-04-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：139-142