微小隐孢子虫重组BCG-Cp23疫苗的构建及鉴定

摘要：

目的 构建和鉴定微小隐孢子虫Cp23基因卡介苗重组疫苗. 方法 用微小隐孢子虫感染免疫抑制BALB/c小鼠,用蔗糖密度梯度离心法纯化其粪便中的卵囊,酚-氯仿法提取微小隐孢子虫的基因组DNA,PCR扩增Cp23基因片段,然后将其克隆TA载体;通过酶切、测序鉴定后,将Cp23基因片段用限制性内切酶切下克隆至大肠埃希菌-分枝杆菌穿梭表达载体pMV262结核杆菌热休克蛋白(HSP)启动子下游,构建重组质粒pMV262-Cp-23,用电穿孔将该质粒导入野生卡介苗(BCG-WT)构建微小隐孢子虫Cp23基因卡介苗重组疫苗.结果 扩增出约360bp的微小隐孢子虫Cp23基因片段并成功构建pMV262-Cp23质粒,通过PCR扩增和提取质粒、酶切表明质粒正确导入BCG-WT中.结论 成功构建微小隐孢子虫Cp23基因卡介苗重组疫苗.

关键词：微小隐孢子虫、Cp23基因、重组卡介苗、构建、鉴定

所属期刊栏目：24

分类号：R382(医学寄生虫学)

资助基金：山东省自然科学基金项目Y2004C22

在线出版日期：2009-03-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：1145-1148