产A型肠毒素金黄色葡萄球菌的筛选及其重组表达

摘要：

目的 分离产A型肠毒素金黄色葡萄球菌标准株,克隆和表达金黄色葡萄球菌肠毒素A (SEA),研究其生物学特征.方法 应用PCR扩增SEA基因片段,与克隆载体pGEM T-easy连接,亚克隆到表达载体pET-28a中,转化大肠杆菌BL21 (DE3),经诱导表达和纯化重组蛋白,用重组蛋白免疫小鼠获得抗血清,进行重组蛋白免疫原性分析.结果 成功克隆SEA全长基因,经DNA序列分析证实与GenBank收录序列具有100%的同源性.表达蛋白相对分子质量为31 000,以包涵体形式存在.纯化、复性后获得有活性的rSEA蛋白,rSEA蛋白能够识别天然的SEA.结论 SEA基因成功克隆到表达质粒内并表达,rSEA具备抗原性,为制备单抗、诊断试剂及金黄色葡萄球菌致病机制研究奠定了基础.

关键词：金黄色葡萄球菌A型肠毒素、重组表达、蛋白纯化、复性

所属期刊栏目：24

分类号：R378.1(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：深圳市农业综合开发基金 2004-33

在线出版日期：2008-07-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：451-454