迟缓爱德华菌溶血活化蛋白EHA的原核表达及生物学活性

摘要：

目的 研究迟缓爱德华菌(Et)溶血活化基因(eha)原核表达蛋白EHA的生物学特性.方法 构建重组载体pET28a+-eha,转入大肠埃希菌BL21,得到克隆子pEHA1.克隆子pEHA1超声破碎后离心, 上清用SDS-PAGE电泳分析.在不同条件下,IPTG诱导pEHA1菌表达EHA蛋白,该蛋白经Ni-NTA亲和层析柱纯化后,检测其溶血活性及Vero细胞毒性.结果 测序结果表明,pET28a+-eha重组质粒的eha序列完全正确.SDS-PAGE电泳显示表达出一条17 kDa左右的条带.在30 ℃,IPTG浓度为0.5 mmol/L的情况下,克隆子pEHA1被诱导6 h产生的蛋白量最多.纯化的EHA蛋白无溶血活性及Vero细胞毒性.结论 eha基因不是溶血素结构基因,可能是一个调控基因.

关键词：迟缓爱德华菌、溶血活化基因、溶血素、原核表达、蛋白纯化

所属期刊栏目：24

分类号：R378(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：江苏省高校自然科学基金04KJD520047;江苏大学博士启动基金2681270003

在线出版日期：2008-05-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：237-239