SARS冠状病毒E蛋白DNA疫苗的构建及其实验免疫研究

摘要：

目的 构建SARS冠状病毒(SARS-CoV)小囊膜蛋白(E蛋白)的DNA疫苗pVAC-E,观察其在小鼠中诱导的免疫应答.方法 采用PCR方法体外扩增SARS冠状病毒E蛋白的基因片段,克隆入真核表达载体pVAC,构建pVAC-E重组质粒.通过脂质体介导瞬时转染非洲绿猴肾(Vero)细胞,Western-blot鉴定E蛋白在细胞中的表达.以基因枪方式免疫小鼠,ELISA检测小鼠血清特异性抗体,MTT法测定淋巴细胞转化率,流式细胞仪检测小鼠脾脏T淋巴细胞亚群分布.结果 成功构建SARS-CoV DNA疫苗pVAC-E.Western-blot结果示,转染后的Vero细胞可表达一约9kD大小能被SARS病人血清特异识别的蛋白条带.免疫小鼠中未检测到明显的抗体滴度升高.淋巴细胞转化率在免疫组和对照组间无差别(P＞0.05).脾脏T淋巴细胞亚群分析示免疫组小鼠CD4+细胞显著升高(P＜0.05),CD48+细胞与对照组相比无显著差异.结论 构建的真核表达质粒pVAC-E能在Vero细胞中表达,表达产物具免疫活性,免疫小鼠后能诱导一定的细胞免疫应答.

关键词：SARS冠状病毒、小囊膜蛋白、DNA疫苗

所属期刊栏目：22

分类号：R373(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：广东省深圳市科技计划2003-k-07

在线出版日期：2007-01-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：1139-1142