增强型绿色荧光蛋白基因在日本血吸虫成虫体内的瞬时表达

摘要：

目的探讨异源性增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因在日本血吸虫成虫体内表达的可能性.方法运用电穿孔技术将质粒pEGFP-C1导入日本血吸虫成虫体内,提取分离体外培养48小时成虫的基因组DNA、总RNA和全虫蛋白,分别用PCR、RT-PCR和Western blot验证转基因在成虫体内的存在、转录和翻译.同时,使用激光共聚焦扫描显微镜对EGFP在成虫体内进行定位.结果 PCR和RT-PCR分别成功的扩增出760bp和276bp的预期大小的片断,Western-blot证实了EGFP基因在成虫体内的表达;激光共聚焦显微镜观察到,EGFP主要定位在成虫的皮层,口吸盘和尾部尤为明显.结论电穿孔技术成功地将异源基因引入日本血吸虫成虫体内并获得表达,为转基因血吸虫和基因功能的研究打下基础.

关键词：电穿孔技术、增强型绿色荧光蛋白、转基因血吸虫

所属期刊栏目：22

分类号：R383.2(医学寄生虫学)

资助基金：科技部科研项目2004AAZZ3570

在线出版日期：2006-03-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：18-21