重组弓形虫GRA8的表达及其诱导的免疫应答

摘要：

目的表达和纯化弓形虫RH株GRA8的截短型片段,分析其诱导的免疫应答.方法从重组克隆pMD18-GRA8中切取GRA8的插入片段,亚克隆至原核表达质粒pET-23a(+)中,转化大肠杆菌BL21,PCR和酶切鉴定转化菌落的插入序列;将构建的原核表达菌株经IPTG诱导,SDS-PAGE分析重组蛋白的表达;大量诱导表达GRA8,金属螯合层析予以纯化,将纯化蛋白免疫小鼠,观察其诱导的免疫应答.结果 GRA8基因的特异片段被亚克隆到原核表达质粒pET-23a(+),在大肠杆菌中未见GRA8的明显表达;表达的蛋白经金属螯合层析获得纯化;纯化蛋白能被弓形虫感染兔血清识别.结论成功构建了GRA8的原核重组表达质粒,纯化的蛋白具有良好的抗原性.

关键词：弓形虫、致密颗粒蛋白、GRA8、纯化、免疫应答

所属期刊栏目：21

分类号：R382.5(医学寄生虫学)

在线出版日期：2005-12-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：991-994