华支睾吸虫一个谷胱甘肽转移酶新基因的克隆与表达

摘要：

目的克隆华支睾吸虫(Clonorchis sinensis,Cs)谷胱甘肽转移酶(glutathione transferase,GST)的一个新基因,并在大肠杆菌中表达.方法用PCR方法从华支睾吸虫成虫cDNA(质粒)文库中扩增新基因CsGST1,对DNA及其推导的氨基酸进行序列分析.将CsGST1克隆到原核表达载体pET-30a(+),在大肠杆菌BL21/DE3表达,用SDS-PAGE鉴定重组蛋白.结果从华支睾吸虫成虫cDNA(质粒)文库扩增出642 bp的CsGST1,序列分析显示它所编码的氨基酸序列与麝猫后睾吸虫GST的同源性最高(88%),并具有GST N-末端和C-末端的保守功能域.构建了重组质粒pET-30a(+)-CsGST1,SDS-PAGE显示CsGST1在大肠杆菌中得到了高效表达,PET-30a(+)-CsGST1的蛋白条带的分子量约为30 kDa.结论成功构建了CsGST1的原核表达载体,并在大肠杆菌中得到了高效表达,为进一步研究该基因的功能打下了基础.

关键词：华支睾吸虫、谷胱甘肽转移酶、克隆、表达

所属期刊栏目：20

分类号：R383.2(医学寄生虫学)

资助基金：广东省自然科学基金;广东省科技厅科技计划2002B31005;广东省广州市科技攻关项目200223-E4022

在线出版日期：2004-08-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：489-491