日本血吸虫(中国大陆株)14-3-3信号转导蛋白epsilon亚型基因[Parasitol1]真核表达重组质粒的构建及序列分析

摘要：

目的构建日本血吸虫中国大陆株14-3-3信号转导蛋白epsilon亚型基因真核表达重组质粒pBK-Sj14-3-3,为进一步对重组蛋白的融合表达及保护性免疫的研究提供条件.方法根据日本血吸虫14-3-3蛋白的核苷酸序列,设计合成一对引物,以日本血吸虫中国大陆株成虫总RNA为模板,用RT-PCR法合成日本血吸虫中国大陆株14-3-3蛋白epsilon亚型基因cDNA片段.将其克隆入pGEM-T载体,经双酶切及PCR鉴定后,再亚克隆入pBK-CMV真核表达质粒,构建重组质粒pBK-Sj14-3-3,转化到大肠杆菌BL21感受态细胞,提取重组质粒双酶切鉴定并进行序列分析.结果 RT-PCR产物、 pGEM-T-Sj14-3-3及pBK-Sj14-3-3分别经双酶切均获得一特异性基因片段.经测序分析后该片段具有一个753bp完整开放阅读框(open reading frame,ORF),由此推导的氨基酸序列具有多种蛋白激酶的磷酸化位点.结论成功地构建了日本血吸虫中国大陆株14-3-3信号蛋白epsilon亚型基因真核表达重组质粒,并对其核苷酸序列及推导的氨基酸序列蛋白激酶磷酸化位点进行分析.

关键词：日本血吸虫、14-3-3蛋白、epsilon亚型、基因测序

所属期刊栏目：20

分类号：R383.2(医学寄生虫学)

资助基金：国家自然科学基金NO:30170841;安徽省自然科学基金NO:44547

在线出版日期：2004-04-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：220-222,227