10.3969/j.issn.1002-2694.2002.06.013
含有弓形虫表面抗原P22、P30复合基因的载体构建
目的选择弓形虫表面抗原P22、P30的有效基因片段,共同构建在同一克隆载体pUC19和表达载体pGEMEXTM-1上,并保证其连接方向及开放读码框的正确.方法根据已发表P30基因序列,用PCR技术调取所需基因片段,P22基因片段来自重组质粒pGEX-2T-v22,将两片段定向克隆于克隆载体pUC19及表达质粒pGEMEXTM-1上,用酶切及测序的方法对重组子进行鉴定.结果酶切产物经电泳显示条带清晰,P22、P30基因片段的泳动位置分别在446bp和860bp的位置,与预计结果一致;测序结果表明插入的复合基因片段方向及序列均正确.结论成功构建的含有P22、P30基因片段的质粒重组体,保证了两基因连接方向、序列及开放读码框的正确,为今后两基因的进一步复合表达研究奠定了基础.
弓形虫、P30基因、P22基因、克隆
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R382.5(医学寄生虫学)
山东省卫生厅资助项目99CA1CAA10
2004-01-08(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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