10.3969/j.issn.1002-2694.2000.05.011
含日本血吸虫脂肪酸结合蛋白(SjFABPc)基因DNA重组质粒pCD-SjFABPc在哺乳动物细胞中的表达
目的观察裸DNA重组质粒pCD-SjFABPc在体外转染HepG2细胞以及质粒DNA免疫鼠肌组织中的表达,为进一步应用该质粒进行DNA免疫实验奠定基础.方法用脂质体介导DNA转染法将pCD-SjFABPc转染贴壁细胞HepG2,G418加压筛选获得阳性克隆细胞并传代培养,SDS-PAGE及Western-blot鉴定目的基因在HepG2细胞中的表达;将pCD-SjFABPc质粒肌注免疫BALB/c小鼠,于6 5d后取注射部位的肌组织约0.3cm3大小,经固定、包埋、切片,免疫酶组织化学染色, 显微照相记录.结果在被转染的HepG2细胞裂解样品中,呈现一分子量约14kDa 大小且能被感染兔血清特异识别的条带;免疫组化结果显示免疫组切片标本中有特异性阳性反应.结论 pCD-SjFABPc质粒能在HepG2细胞及小鼠肌细胞中表达目的蛋白.
日本血吸虫、脂肪酸结合蛋白、重组质粒、表达
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R373.2(医学微生物学(病原细菌学、病原微生物学))
中山医科大学校科研和教改项目
2004-01-08(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共4页
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