T载体的构建及在恶性疟原虫RAP2基因克隆中的应用研究

摘要：

目的构建PCR产物高效克隆载体T载体,并应用于克隆恶性疟原虫RAP2基因.方法 PUC18用SmaI酶切纯化后,与dTTP在70℃孵育3h,构建 T载体.另设计一对特异引物,采用PCR方法从恶性疟原虫FCC1/HN株基因组DN A中特异扩增RAP2基因,并将其克隆入T载体,重组克隆经蓝白斑初筛后,再用双酶切及PCR法进行鉴定.结果从恶性疟原虫基因组DNA中特异扩增出大小为1215bp基因片段,与预期长度相符.克隆入T载体后的重组克隆经双酶切及PCR鉴定均正确无误.结论成功构建T载体,并获得阳性重组克隆T-RAP2,为进行该R AP2基因的序列测定及研究该基因的结构与功能奠定基础.

关键词：恶性疟原虫、T载体、RAP2、聚合酶链式反应、克隆

所属期刊栏目：16

分类号：R382.3(医学寄生虫学)

资助基金：广东省博士启动基金;中山医科大学校科研和教改项目

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：32-35