10.3969/j.issn.1001-2230.2016.05.005
动物源性食品中抗司帕沙星单克隆抗体的研制与鉴定
为了制备高灵敏、高特异性的司帕沙星(SPFX)单克隆抗体,鉴定免疫学特性.采用蛋白质偶联技术DCC法制备免疫抗原SP-FX-BSA和包被抗原SPFX-OVA,免疫BALB/c小鼠,用间接ELISA和阻断ELISA选出产生优质多克隆抗体的的小鼠进行细胞融合,经过多次亚克隆筛选出分泌高敏感的特异性抗SPFX单克隆抗体的杂交瘤细胞株,体内诱生腹水法制备抗SPFX的单克隆抗体并对其免疫学特性进行鉴定.结果表明,间接ELISA检测显示免疫的6只小鼠效价均达1.28:104以上,融合后筛选出四株杂交瘤细胞株4H4-C8,4H4-C4,4H4-B1和4H4-E9;其细胞上清效价分别为1:1.4× 103,1:8.0× 102,1:5.0×102,1:6.7× 102;4H4-C8株腹水效价为1:2.6× 106,抗SPFX的单克隆抗体对SPFX的IC50为31 μg/L,且具有较好的特异性.本研究成功合成SPFX人工抗原,制备出优质的单克隆抗体,为SPFX免疫学快速检测方法的建立奠定坚实的基础.
司帕沙星、人工抗原、单克隆抗体、免疫学特性
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S859.84(动物医学(兽医学))
农业部公益性行业农业科研专项201003008-09
2016-07-05(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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