重组牛凝乳酶基因在Bacillus megaterium WH320中的表达及其酶学性质研究

摘要：

对牛凝乳酶基因进行密码子优化,并首次在高效表达宿主巨大芽孢杆菌中表达.通过克隆牛凝乳酶基因,将片段与穿梭质粒pHIS1525连接,连接产物转化大肠杆菌XL-10,筛选出阳性克隆子,所获重组质粒经酶切、测序鉴定,证实含目的片段.通过原生质体转化的方法转化到表达宿主巨大芽孢杆菌WH320.用木糖诱导表达,离心取上清经镍柱亲和层析(Ni-NTA)和聚丙烯酰氨凝胶电泳(SDS-PAGE)分离纯化并鉴定,测定重组牛凝乳酶的酶学性质,表明在巨大芽孢杆菌中得到有效表达.为我国利用生物工程技术的方法自主生产凝乳酶提供了基础..

关键词：重组凝乳酶、巨大芽孢杆菌、酶学性质

所属期刊栏目：41

分类号：Q814(生物工程学(生物技术))

在线出版日期：2013-08-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：4-6