鼠抗早孕因子单克隆抗体的制备及鉴定
目的 制备鼠抗早孕因子(EPF)单克隆抗体,纯化并进行鉴定.方法 用重组EPF免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术获得抗EPF杂交瘤细胞株,注入BALB/c小鼠腹腔制备腹水型单抗,Protein-G亲和层析纯化后,SDS-PAGE电泳鉴定其纯度,用间接ELISA法测抗体效价,ELISA相加试验测定抗原表位,用Western blotting鉴定其特异性,并进行类及亚类、细胞染色体核型分析.结果 筛选出2株具有较高活性和良好稳定性的分泌抗EPF单克隆抗体的杂交瘤细胞株,其腹水的抗体效价均高于2×10-5,2株单抗均为IgG类IgG1亚类,轻链类型均为κ细胞核型分析符合杂交瘤细胞特征,特异性良好,2株单抗有不同的抗原表位.SDS-PAGE电泳显示纯化后抗体有较高的纯度,Western blotting表明其与EPF抗原有特异结合性.结论 成功制备2株具有较高活性的鼠抗EPF单克隆抗体,为建立检测EPF方法奠定了良好的基础.
早孕因子、单克隆抗体、鉴定
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R714.15(妇产科学)
广东省科技计划重点项目2008A030201022
2012-09-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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