大肠杆菌偏嗜性Osteostat胞外段编码基因的克隆

摘要：

目的 采用基因工程的手段研制人Osteostat胞外蛋白,通过大肠杆菌偏嗜性人Osteostat胞外段编码基因的克隆,为重组蛋白的研发作初步准备.方法 按照氨基酸密码子的简并性原则将人Osteostat胞外段编码系列全部替换成大肠杆菌偏嗜性密码子,并将其分成三段扩增,再通过重叠延伸PCR将三个片段连接起来.然后,将回收的人Osteostat基因片段和pQE-30Xa表达载体相连,转化大肠杆菌感受态细胞,进行初步的诱导表达,表达产物行SDS-PAGE分析.结果 通过重叠延伸PCR获得了大肠杆菌偏嗜性的编码序列,通过测序验证了其序列的正确性.对重组表达载体转化菌进行诱导表达,SDS-PAGE分析证实获得预期分子量的目标蛋白.结论 大肠杆菌偏嗜性的人Osteostat胞外段编码基因表达载体的构建为重组蛋白的研发打下基础.

关键词：Osteostat、肿瘤坏死因子超家族、重叠延伸PCR、克隆、表达

所属期刊栏目：7

分类号：R378.2+1(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

在线出版日期：2007-12-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：1979-1982