芒果果实多酚氧化酶(PPO)基因的克隆与表达分析

摘要：

多酚氧化酶(Polyphenol oxidase,PPO)是引起水果褐变的关键酶.为了研究芒果果实中PPO基因的功能,本试验采用RACE方法从'贵妃'芒果果实中克隆得到了 1个PPO基因,该基因cDNA序列全长为1930bp,开放阅读框为1782bp,编码593个氨基酸.芒果PPO基因编码的多酚氧化酶属于亲水性蛋白质,分子重量为66.82KD,等电点为6.95,不含跨膜结构和信号肽,为非分泌蛋白,包含Tyrosinase、PPO1_DWL和PPO1_KFDV保守结构域.芒果PPO蛋白的二级结构无规则卷曲、β-折叠和α-螺旋占比分别为63.58％、22.60％和13.83％,三级结构与模板6els.1.A一致性达70.94％,可能与 C2H2 and C2HC zinc fingers superfamily protein(TT1),Multidrug resistance protein,mate family(TT12)和Autoinhibited H(+)-ATPase isoform 10(AHA10)等存在相互作用.聚类分析表明该蛋白与开心果、橄榄、克莱门柚和甜橙等植物的亲缘关系较近.通过qRT-PCR分析,芒果PPO基因主要在'桂七'果皮中表达量较高,而在'贵妃'果皮中表达量较低.该基因的克隆及其功能的研究对芒果抗酶促褐变品种的培育以及分子改良具有重大意义.

关键词：芒果、多酚氧化酶、克隆、表达分析

分类号：S663.9;Q786;S852.65

资助基金：广西芒果生物学重点实验室开放课题;国家香蕉产业技术体系项目;海南省重点研发计划

在线出版日期：2023-11-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共10页

页码：9-17,70