晚期糖基化终末产物调控平滑肌细胞钙化的机制研究

摘要：

目的 探讨晚期糖基化终末产物(AGEs)调控其受体促进人股动脉平滑肌细胞钙化的机制.方法 2014年1月-2015年3月,将股动脉中膜平滑肌层剪成1~2 mm组织块培养,选取3~8代平滑肌细胞用于实验.将平滑肌细胞分为4组,A组单纯于DMEM培养基中培养,B组于含10 mmol/L β磷酸甘油钠的DMEM培养基中培养,C、D组分别于含10 mmol/L β磷酸甘油钠的DMEM培养基中加入20、40 mg/L AGEs,各组平滑肌细胞干预培养96 h.合成3对随机AGEs受体(RAGE)siRNA,以50 nmol/L转染C组平滑肌细胞,24 h后进行siRNA沉默效果检测,选取转染效率较高的序列用于实验.分别取转染前后平滑肌细胞,采用Von Kossa染色实验观察平滑肌细胞内钙沉积情况,采用Western blotting法检测RAGE、β-catenin、骨保护素(OPG)表达水平.结果 未转染的平滑肌细胞中,A组无钙化斑块形成,B组可见明显的钙化斑块;C、D组细胞质、细胞核呈现粉红色的数量增加,钙化斑块明显增多.经转染后,C组平滑肌细胞细胞质、细胞核呈现粉红色的数量较未转染细胞减少,钙化斑块形成受到抑制.未转染的各组平滑肌细胞RAGE、β-catenin、OPG表达水平比较,差异均有统计学意义(P<0.05);其中,C组平滑肌细胞RAGE、β-catenin、OPG表达水平高于B组,D组平滑肌细胞RAGE、β-catenin、OPG表达水平高于B、C组(P<0.05).C组平滑肌细胞转染后RAGE、β-catenin、OPG表达水平均低于转染前(P<0.01).结论 AGEs通过与其受体结合而介导平滑肌细胞钙化,其机制可能为RAGE激活Wnt/β-catenin信号通路,使β-catenin下游蛋白OPG表达水平升高.

关键词：糖尿病、血管钙化、晚期糖基化终末产物、骨保护素

所属期刊栏目：20

分类号：R587.1(内分泌腺疾病及代谢病)

资助基金：国家自然科学基金面上项目81270358

在线出版日期：2017-07-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：2490-2494