妊娠期糖尿病孕妇大网膜下脂肪组织全基因组 DNA 甲基化研究

摘要：

背景大网膜下脂肪组织与妊娠期糖尿病（GDM）密切相关，目前，关于 GDM 孕妇大网膜下脂肪组织全基因组 DNA 甲基化研究较少。目的研究 GDM 孕妇和无 GDM 孕妇大网膜下脂肪组织全基因组 DNA 甲基化差异，为寻找 GDM 可能的致病基因提供线索。方法选取2012年1月—2014年5月于昆明医科大学第一附属医院妇产科门诊定期产前检查并入院分娩的 GDM 孕妇3例为病例组，同期健康孕妇3例为对照组。剖宫产术中剥离大网膜下脂肪组织，提取全基因组 DNA。经变性和扩增后酶切扩增产物，将 DNA 片段与 Illumina Methylation BeadChip 芯片进行杂交。根据 Methylation Analysis Algorithms 生成各样本每个位点的甲基化水平，经过偏差校正和位点过滤，得到甲基化水平。采用 DAVID 数据库对具有显著性差异的甲基化基因进行 Gene Ontology（ GO）和 Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes（KEGG）信号通路分析。另分别选取同期 GDM 孕妇和无 GDM 孕妇各5例，验证候选基因启动子区域甲基化水平差异。结果病例组1298个基因低甲基化，1570个基因高甲基化，其中 TMEM195、TCF7L2、IGF1、IGF1R 甲基化可能与血糖调控密切相关，DGKG、NRXN3甲基化可能与体质指数（BMI）密切相关。GO 功能分析显示，低甲基化基因参与的生物学过程主要是级联反应的活性调节、细胞凋亡调节及蛋白转运等，细胞成分主要为细胞外基质；高甲基化基因参与的生物学过程主要是抗原处理和呈递、主要组织相容复合体（MHC）Ⅱ参与的抗原处理和呈递，细胞成分主要为肌动骨架蛋白、MHC 等。KEGG 信号通路分析中，富集数＞20.000的通路有抗原处理和呈递（富集数为23.142）、过氧化物酶体增殖物激活受体（ PPAR）信号通路（富集数为22.068）。分别选取参与抗原处理和呈递、PPAR 信号通路中的甲基化差异基因人类白细胞抗原 G（HLA-G）、PPARGC1A 进行验证。GDM 孕妇大网膜下脂肪组织HLA-G启动子区域甲基化水平高于无 GDM 孕妇（t ＝4.968，P ＝0.001）。两者大网膜下脂肪组织 PPARGC1A 启动子区域甲基化水平比较，差异无统计学意义（t ＝0.929，P ＝0.380）。结论 GDM 孕妇和健康孕妇大网膜下脂肪组织基因甲基化位点和水平存在显著差异，甲基化差异基因主要参与抗原处理和呈递及 PPAR 信号通路途径。

关键词：糖尿病、妊娠、DNA 甲基化、脂肪组织、抗原呈递、过氧化物酶体增殖物激活受体、全基因组关联研究

所属期刊栏目：20

分类号：R714.256(妇产科学)

资助基金：国家自然科学基金资助项目81360103；云南省科技厅2012FB039---昆明医学院应用基础研究联合专项资金项目；中央高校基本科研业务费&协和青年基金资助项目33320140013

在线出版日期：2017-03-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：159-164