腰椎间盘突出症活血化瘀治疗的目标蛋白筛选及鉴定

摘要：

背景活血化瘀属于中医药特色疗法，也是临床上非手术治疗腰椎间盘突出症( LIDP）疗效优良的主要方法之一，既往有学者从病理、影像、免疫及基因等角度开展了大量研究，但有关活血化瘀治疗LIDP机制仍未明了。目的通过同位素标记相对和绝对定量技术( iTRAQ）结合液相色谱与串联质谱( LC-MS／MS）筛选和鉴定LIDP活血化瘀治疗前后差异表达蛋白，筛选LIDP活血化瘀治疗的目标蛋白。方法选取2013年7月—2014年12月于广西中医药大学第一附属医院治疗的血瘀证LIDP患者30例为研究对象，予活血化瘀治疗4周，观察患者临床疗效。分别于治疗前后提取患者外周血血清，通过去除高丰度蛋白、测定蛋白浓度、酶解蛋白、肽段iTRAQ标记、高效液相色谱分离、 LC-MS／MS分析等程序和方法，筛选及鉴定治疗前后的差异表达蛋白。结合基因本体论注释及KEGG通路分析相关生物信息学，对差异蛋白的功能和代谢通路进行分析。结果治疗后临床控制19例，显效8例，有效2例，无效1例，总有效率为96.7％(29／30）。 iTRAQ联合LC-MS／MS鉴定到300个蛋白质组，其中209个蛋白各通道标记标签均有定量信息，筛选出20个差异表达蛋白，其中呈上调表达及下调表达的差异蛋白各10个。本研究对20个差异蛋白的KEGG富集结果显示，9个差异蛋白富集到27条信号通路。补体和凝血级联反应富集到3个差异蛋白， PPAR信号通路、百日咳、美洲锥虫病、金黄色葡萄球菌感染及系统性红斑狼疮富集到2个差异蛋白。百日咳、美洲锥虫病、金黄色葡萄球菌感染及系统性红斑狼疮等11条信号通路富集到补体C3， PI3K-Akt信号通路、黏着斑、肌动蛋白细胞骨架调节等9条信号通路富集到纤维连接蛋白1。结论活血化瘀治疗血瘀证LIDP效果显著；载脂蛋白A1、载脂蛋白M、载脂蛋白C3、纤维连接蛋白1及补体C3很可能是血瘀证LIDP选用活血化瘀治疗的潜在血清靶蛋白。

关键词：椎间盘移位、证型、活血祛瘀剂、蛋白质组学

所属期刊栏目：19

分类号：R681.53(骨科学（运动系疾病、矫形外科学）)

资助基金：国家自然科学基金资助项目81260544；广西自然科学基金资助项目2013GXNSFAA019194；广西医疗卫生适宜技术研究与开发课题S201307-1

在线出版日期：2016-11-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：3950-3955