壁虎活性单体衍生物腺嘌呤对人肝癌细胞作用的实验研究

摘要：

目的：探讨壁虎活性单体衍生物腺嘌呤对人肝癌细胞的抑制作用及机制。方法2014年9月—2015年4月，收集对数生长期的人肝癌Bel-7402细胞进行实验，将96孔板的第2～9列作为腺嘌呤组〔加入腺嘌呤的浓度分别为0.50000、0.25000、0.12500、0.06250、0.03125、0.01563、0.00781、0.00391 mg/ml（分别记为A组～H组）〕，第10列作为对照组（加入含10%胎牛血清的RPMI-1640培养液），第11列作为空白组。采用噻唑蓝（ MTT）法计算不同浓度腺嘌呤组不同时间（培养24、48、60 h）抑瘤率及腺嘌呤组半抑制浓度（ IC50）。将对数生长期的人肝癌Bel-7402细胞分为腺嘌呤组（加入0.50000 mg/ml的腺嘌呤）和对照组（加入含10%胎牛血清的RPMI-1640培养液），采用透射电镜观察细胞超微结构。将对数生长期的人肝癌Bel-7402细胞分为腺嘌呤组（加入0.50000 mg/ml的腺嘌呤）和对照组（加入含10%胎牛血清的RPMI-1640培养液），采用流式细胞仪检测细胞周期。结果24 h时，B组～H组抑瘤率均低于A组，C组～H组抑瘤率均低于B组，D组～H组抑瘤率均低于C组，E组～H组抑瘤率均低于D组，E组～G组抑瘤率均高于H组（P<0.05）；48 h时，B组～H组抑瘤率均低于A组，C组～H组抑瘤率均低于B组，D组～H组抑瘤率均低于C组，D组、E组抑瘤率均高于H组（P<0.05）；60 h时，B组～H组抑瘤率均低于A组，C组～H组抑瘤率均低于B组，D组～H组抑瘤率均低于C组，D组～F组抑瘤率均高于G组和H组（ P<0.05）。C组、E组～H组24 h时抑瘤率均低于48 h时抑瘤率，A组～F组24 h时抑瘤率均低于60 h时抑瘤率，G组24 h时抑瘤率高于60 h时抑瘤率，A组～D组48 h时抑瘤率均低于60 h时抑瘤率，G组、H组48 h时抑瘤率高于60 h时抑瘤率（P<0.05）。不同时间IC50比较，差异有统计学意义（F=16.816，P<0.001）；48 h、60 h时IC50低于24 h时，60 h时IC50低于48 h时（P<0.05）。腺嘌呤作用48h 后，肝癌细胞出现明显的线粒体改变。对照组G0/G1期、G2/M期人肝癌Bel-7402细胞数高于腺嘌呤组，S期人肝癌Bel-7402细胞数低于腺嘌呤组（ P<0.05）；腺嘌呤组S期人肝癌Bel-7402细胞数高于G0/G1期，G2/M期人肝癌Bel-7402细胞数低于S期（P<0.05）。结论腺嘌呤抑制人肝癌细胞的增殖且呈一定的浓度、时间依赖性。腺嘌呤可引起人肝细胞线粒体改变，可将肿瘤细胞阻滞于S期并进一步诱导其凋亡进而发挥抗肿瘤作用。

关键词：肝肿瘤、壁虎活性单体、腺嘌呤、细胞凋亡

分类号：R735.7(肿瘤学)

资助基金：国家自然科学基金资助项目81202992，81102735；山东省自然科学基金资助项目 ZR2011HQ023， ZR2014HP008；山东省医药卫生科技发展计划项目2011QZ026

在线出版日期：2015-09-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：3308-3313