miR-650靶向PRDX2调控幽门螺旋杆菌对胃癌细胞氧化应激的机制研究

摘要：

背景与目的:幽门螺旋杆菌(HP)在人类胃部的定植是引起胃癌发生较明确的危险因素,且研究发现,HP感染后胃癌细胞的氧化应激水平有明显改变,但机制尚未明确.因此,本研究探讨HP引起胃癌细胞氧化应激的潜在机制和作用.方法:用HP感染胃癌细胞SNU-1后,分别用DCF-DA荧光法和CCK-8法检测的活性氧(ROS)水平和增殖能力的变化;用高通量测序和siRNA筛选鉴定HP感染后引起SNU-1细胞氧化应激增强的关键基因,随后通过miRDB在线分析和荧光素酶报告系统鉴定引起胃癌细胞SNU-1氧化应激的关键上游miRNA,同时结合功能获得与功能缺失实验验证.结果:SNU-1细胞感染HP后,ROS水平升高,增殖能力增强,但同时使用氧化应激抑制剂乙酰半胱氨酸处理,SNU-1细胞的以上变化被取消(均P＞0.05).siRNA筛选结果发现,敲低过氧化氢酶2(PRDX2)时HP感染的SNU-1细胞ROS水平升高,增殖能力增强,而过表达PRDX2后则相反(均P＜0.05),同时Western blot验证显示,HP感染后SNU-1细胞中PRDX2的表达下调.HP感染后,SNU-1细胞中PRDX2的启动子活性没有变化(P＞0.05),但PRDX2的mRNA水平下降(P＜0.05).分析结果显示,HP感染的SNU-1细胞中miR-650的表达水平上升(P＜0.05),且miR-650靶向PRDX2 mRNA的3'端非编码区.验证结果显示,SNU-1细胞过表达miR-650后,PRDX2的表达下调、ROS水平升高、增殖能力增强,敲低miR-650后则呈反向变化(均P＜0.05);HP感染的SNU-1细胞同时敲低miR-650或同时过表达PRDX2,细胞的增殖能力无明显变化(均P＞0.05).结论:HP感染增加胃癌细胞氧化应激水平的机制和作用可能是其上调miR-650的表达,后者靶向PRDX2 mRNA的3'端非编码区抑制PRDX2 mRNA与蛋白表达,导致ROS水平升高,从而促进胃癌细胞的增殖.

关键词：胃肿瘤、幽门螺杆菌、氧化性应激、细胞增殖、硫氧还原蛋白过氧化物酶类、微RNAs

所属期刊栏目：32

分类号：R735.2(肿瘤学)

在线出版日期：2023-03-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：231-238