靶向hTERT、hTR新型RNAi表达框架的构建及应用效果观察

摘要：

目的：构建靶向hTERT、hTR的新型RNAi表达框架，探讨单独及联合干扰hTERT、hTR基因对肿瘤细胞端粒酶活性、细胞凋亡及周期的影响，以期找到肿瘤基因治疗的新策略。<br>　　方法：融合PCR构建靶向hTERT、hTR的RNAi表达框架。各表达框架经鉴定后分别或联合转染A549细胞，TRAP-银染法及TRAP-qPCR法检测端粒酶活性，流式细胞仪检测细胞凋亡及周期。<br>　　结果：靶向hTERT、hTR的新型RNAi表达框架构建成功。与空白对照组或阴性对照组比较，无论转染靶向hTERT或靶向hTR的RNAi表达框架后，A549细胞的端粒酶活性均明显降低，细胞凋亡率均明显增加，细胞G1阻滞明显增加，而联合转染靶向hTERT与靶向hTR的RNAi表达框架后，A549细胞的上述改变较各自单独转染更为明显（均P<0.05）。<br>　　结论：靶向hTERT、hTR的新型RNAi表达框架能够有效抑制A549细胞的端粒酶活性，诱导细胞凋亡，改变细胞周期。以人工miRNA表达框架为基础的新型RNAi技术有望成为肿瘤基因治疗的新工具。

关键词：末端转移酶端粒、RNA干扰、表达框架

所属期刊栏目：25

分类号：R730.5(肿瘤学)

资助基金：中南大学研究生科研创新基金资助项目2016zzts500；中南大学本科生自由探索基金资助项目201610533579。

在线出版日期：2017-01-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：1738-1744