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10.7659/j.issn.1005-6947.2013.09.014

AIBP在肝癌细胞中的表达及意义与含AIBP基因及AFP启动子驱动的双自杀基因表达载体构建

引用
目的:探讨载脂蛋白A-I结合蛋白(AIBP)在肝癌细胞中的表达及意义.方法:用RT-PCR与Western blot法分别检测正常肝细胞株L02,AFP阳性人肝癌细胞株HepG2和Hep3B,及AFP阴性人肝癌细胞株SMMC7721中AIBP基因与蛋白的表达;构建AFP启动子驱动的双自杀基因(CD,TK) +AIBP基因过表达载体pcDNA3.1-AFP-AIBP-yCD/TK,并转染Hep3B和SMMC7721细胞,用MTT法检测转染后细胞的增殖能力,用RT-PCR和Western blot法检测细胞AIBP,血管内皮生长因子(VEGF),VEGF受体2(VEGFR-2),基质金属蛋白酶9(MMP-9)基因和蛋白的表达.结果:AIBP mRNA和蛋白在正常肝细胞中高表达,而在各肝癌细胞系中均表达下调,且Hep3B和SMMC7721细胞中下调明显.成功构建pc DN A3.1-AFP-AIBP-yC D/TK真核表达质粒并转染入Hep3B和SMMC7721细胞.转染后AFP阳性Hep3B细胞生长到明显抑制,但AFP阴性SMMC7721细胞增殖不受影响;两种细胞的AIBP基因与蛋白表达均明显上调,而VEGFR-2,VEGF和MMP-9基因与蛋白表达明显表达下调.定量指标间的差异均有统计学意义(均p<0.05).结论:AIBP在肝癌细胞中表达下调,AIBP与肝癌细胞的侵袭转移能力有关,而与细胞增殖能力无关;成功构建了联合基因载体pcDNA3.1-AFP-AIBP-yCD/TK.

癌,肝细胞、载脂蛋白A-I、血管内皮生长因子受体2

22

R735.7(肿瘤学)

湖南省科学技术厅科技计划资助项目2011SK3227&2010SK3105

2013-11-01(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)

共6页

1173-1178

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中国普通外科杂志

1005-6947

43-1213/R

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2013,22(9)

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