靶向CXCR1基因的shRNA真核表达质粒的构建及鉴定

摘要：

目的:构建靶向化学趋化因子受体1(CXCR1)的短发夹小干扰RNA(shRNA)质粒表达载体.方法:针对人CXCR1基因的mRNA序列,按RNA干扰靶位点的设计原则,设计并构建靶向CXCR1基因的3个shRNA质粒表达载体和1个阴性对照质粒表达载体,经酶切和测序确认构建成功后,转染胃癌细胞MKN45,RT-PCR和Western blot检测CXCR1 mRNA和蛋白的表达.结果:经酶切和测序证实,3个靶向CXCR1基因的shRNA真核表达质粒均构建成功;与未转染和转染阴性对照质粒的MKN45细胞比较,转染3种shRNA质粒的MKN45细胞,CXCR1 mRNA和蛋白水平均明显下调(均P＜0.05).结论:靶向CXCR1基因的shRNA真核表达质粒的成功构建,为进一步研究CXCR1在胃癌中的功能和实验性靶向治疗提供了初步的基础.

关键词：胃肿瘤、受体,CXCR、RNA,小分子干扰

所属期刊栏目：22

分类号：R735.2(肿瘤学)

资助基金：湖南省研究生科研创新资助项目CX2011B046;湖南省长沙市科技计划资助项目K1005005-31, K1106041-31

在线出版日期：2013-05-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：456-462