shRNA介导的热休克蛋白70敲低对人结肠癌细胞在裸鼠体内生长的影响
目的:探讨热休克蛋白70(HSP70)敲低对结肠癌细胞在裸鼠体内生长的影响.方法:构建两种干扰HSP70的shRNA(HSP70 shRNA-1和HSP70 shRNA-2)质粒表达载体,分别转染到结肠癌HT29细胞,并以空质粒转染(阴性对照)和未转染的HT29细胞(空白对照)为对照,用RT-PCR和Western blot方法检测各组HT29细胞HSP70基因和蛋白的表达；将HSP70shRNA-2转染、空质粒转染及未转染的HT29细胞分别接种至裸鼠皮下建立移3组植瘤模型,观察肿瘤生长情况,3周后剥离瘤块,用HE染色、免疫组化和TUNEL法分别检测移植瘤组织形态学、增殖细胞核抗原(PCNA)的表达及细胞凋亡情况.结果:RT-PCR和Western blot结果显示HSP70 shRNA-1和HSP70 shRNA-2均能明显抑制HT29细胞HSP70基因和蛋白的表达,且HSP70 shRNA-2的抑制作用更为明显,空质粒转染对HSP70的表达无明显影响；与空白对照组比较,HSP70 shRNA-2转染组裸鼠移植瘤生长明显较明显减慢(P＜0.01),瘤组织中心出现明显坏死,PCNA表达明显降低,细胞凋亡率明显增加(P＜0.01),而空质粒转染组无明显上述改变(P＞0.05).结论:HSP70沉默能抑制结肠癌HT29细胞裸鼠移植瘤的生长,促进细胞凋亡,HSP70可能是治疗结肠癌有效靶点.
结肠肿瘤、HSP70热休克蛋白质类、RNA干扰、细胞凋亡
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R735.3(肿瘤学)
国家自然科学基金资助项目30872510;上海市自然科学基金资助项目09ZR1416400
2013-03-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共6页
1535-1540
