慢病毒载体介导RNAi靶向抑制胰腺癌细胞survivin表达并诱导细胞凋亡的实验研究
目的 探讨运用慢病毒载体介导的RNA干扰技术对survivin的抑制效率及对胰腺癌细胞SW1990凋亡的影响.方法 应用pGCSIL-neo质粒构建3对针对survivin的慢病毒ShRNA载体,转染包装细胞293T,收集病毒上清转染胰腺癌细胞系SW1990,实时荧光定量PCR和western-blot免疫印迹检测癌细胞内survivin的表达;测定caspase3/7活性和DAPI染色检测细胞凋亡.结果 成功构建3个survivin-ShRNA慢病毒载,LVshRNA-survivin-1对survivn的mRNA和蛋白表达抑制效率分别为73.50%和87.64%;与对照组相比,其caspase3/7活性升高14.5倍,细胞凋亡明显增加(11.95%).结论 慢病毒载体介导的Suvivin-ShRNA靶向转染可有效抑制survivin表达,并显著增加胰腺癌细胞的凋亡.
胰腺肿瘤、RNA干扰、survivin、慢病毒载体、细胞凋亡
19
R735.9(肿瘤学)
国家自然科学基金30872492;湖南省自然科学基金08JJ3042
2010-05-31(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共7页
227-233