特应性皮炎差异表达基因筛选及KLF15对AD小鼠血清中Th1/Th2型细胞因子水平的影响

摘要：

目的 分析特应性皮炎(AD)患者皮损组织中差异表达基因(DEGs)及其功能作用,并探究其中的Kruippel样因子15(KLF15)对AD小鼠血清中Th1/Th2型细胞因子水平的影响.方法 基于GSE157194芯片筛选AD患者皮损组织中的差异表达基因,通过Metascape在线分析工具进行基因本体(GO)功能分析和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析.进一步通过基因芯片验证KLF15在AD皮损组织与正常皮肤组织中的差异表达水平及治疗前后的表达变化.将16只BALB/c小鼠随机分为对照组(n=4),模型组(n=4),OE-NC组(n=4,空载质粒),OE-KLF15组(n=4,KLF15过表达质粒).利用二硝基氯苯(DNCB)涂抹小鼠左耳构建AD小鼠模型,验证KLF15在AD小鼠组织中的表达水平.构建KLF15过表达载体,并注射至各小鼠皮损处,qPCR和Western blot检测转染效率,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测白细胞介素(IL)-4、IL-13、IL-31和干扰素(IFN)-γ的表达水平.结果 与正常皮肤组织相比,治疗前AD患者的皮损组织中有74个下调的DEGs及331个上调的DEGs,主要与细菌应答、炎症反应、Th2型免疫激活、皮肤发育、细胞离子代谢、调节类固醇代谢过程以及Wnt通路调控显著相关.与治疗前正常皮肤组织样本(AN)相比,皮损组织样本(AL)中KLF15表达显著下调(|logFC|＞1,P＜0.05).使用度普利尤单抗或环孢菌素治疗3个月后,AN与AL中KLF15表达水平差异无统计学意义(|logFC|＞1,P＞0.05).对照组小鼠表皮、真皮结构正常,无炎性细胞浸润.模型组小鼠出现棘层肥厚、真皮层水肿并伴有大量炎细胞浸润.与对照组小鼠比较,AD小鼠KLF15 mRNA及蛋白水平显著下调(P＜0.05).与OE-NC组比较,OE-KLF15组小鼠血清中IL-4、IL-13和IL-31的表达水平显著下调(P＜0.01),KLF15、IFN-γ的表达水平显著上升(P＜0.01).结论 KLF15在AD患者皮损组织中下调,KLF15可能通过改善AD小鼠血清中Th1/Th2平衡,减轻炎症反应,缓解皮肤损伤.

关键词：特应性皮炎、Krüppel样因子15(KLF15)、Th1/Th2平衡、炎症因子

所属期刊栏目：37

分类号：R758.2(皮肤病学与性病学)

资助基金：国家自然科学基金;湖南省卫健委科研课题;湖南省自然科学基金项目

在线出版日期：2023-08-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：645-651