复方黄柏液调节AKT/eNOS信号通路对皮肤破损大鼠血管生成和创口愈合的影响

摘要：

目的 观察复方黄柏液对皮肤破损大鼠创面细胞因子表达、血管生成和创口愈合的影响,并探讨复方黄柏液促进伤口愈合的机制.方法 SD大鼠随机分为对照组、复方黄柏液组、复方黄柏液+GSK组(复方黄柏液+GSK-690693 20 mg/kg),每组12只.构建皮肤缺损大鼠模型后,复方黄柏液组采用复方黄柏液冲洗创面,复方黄柏液+GSK组在用复方黄柏液冲洗创面的同时灌胃GSK-690693,对照组给予等体积无菌生理盐水冲洗创面和灌胃,1次/d,连续干预21 d.在干预后第7、14和21天观察创面恢复情况,计算伤口愈合率;HE染色观察伤口组织病理学变化,并计算再上皮化率;ELISA法检测血清白细胞介素(IL)-1β、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和IL-10水平;免疫荧光染色法检测血管生成;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测伤口组织中血管内皮生长因子(VEGF)、成纤维细胞生长因子(FGF)-2、表皮生长因子(EGF)、Ⅰ型胶原α2(COL1α2)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、MMP-9的mRNA表达;蛋白质印迹(Western blot)检测伤口组织中蛋白激酶B(AKT)、磷酸化AKT(p-AKT)、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)和磷酸化eNOS(p-eNOS)蛋白表达.结果 与对照组相比,复方黄柏液组大鼠伤口愈合速度较快,伤口愈合率、再上皮化率、血清IL-10水平、CD31阳性细胞率、伤口组织VEGF、FGF-2、EGF、COL1α2 的 mRNA 水平和 p-AKT/AKT、p-eNOS/eNOS 比值显著升高,血清IL-1β和TNF-α水平、伤口组织MMP-2和MMP-9的mRNA水平显著降低(P＜0.05);使用AKT抑制剂GSK-690693抑制AKT活化,可抑制eNOS磷酸化,并显著减弱复方黄柏液的促血管生成和伤口愈合作用(P＜0.05).结论 复方黄柏液可能通过激活AKT/eNOS通路,促进血管生成,加速皮肤伤口组织修复.

关键词：皮肤伤口愈合、复方黄柏液、血管生成、蛋白激酶B、内皮型一氧化氮合酶

所属期刊栏目：36

分类号：R751(皮肤病学与性病学)

资助基金：武汉市医学科研项目WZ20C39

在线出版日期：2023-02-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：1390-1397