10.13735/j.cjdv.1001-7089.201908164
3-甲基腺嘌呤增强ALA-PDT对皮肤鳞状细胞癌A431细胞的杀伤作用
目的 探讨5-氨基酮戊酸光动力疗法(ALA-PDT)联合3-甲基腺嘌呤(3-MA)对皮肤鳞状细胞癌A431细胞的杀伤作用及其机制研究.方法 体外培养人皮肤鳞状细胞癌A431细胞,设置不同的ALA浓度(0、0.20、0.40、0.80、1.60 mmol/L)及不同的培养时间(12、24、48 h),对A431细胞进行ALA-PDT处理,采用MrTT法检测细胞增殖活性并计算半抑制浓度(IC50)值.根据实验需要将A431细胞分为空白对照组、ALA-PDT组、3-MA组和ALA-PDT+ 3-MA组.分组处理后,MTT法检测细胞增殖;流式细胞术分别检测细胞凋亡(Annexin V-FITC/PI双染法)以及细胞线粒体膜电位变化(JC-1染色法);单丹磺酰尸胺(MDC)染色法观察细胞自噬情况;Western blot检测凋亡和自噬相关蛋白的表达水平.结果 ALA-PDT对A431细胞的增殖活性有明显的抑制作用,且呈剂量和时间依赖性.与对照组比较,ALA-PDT组细胞增殖活性、线粒体膜电位均显著降低(P＜0.05),而细胞凋亡与自噬水平显著提高(P＜0.05),Cleaved-caspase-3、Bax、胞质Cyt C、LC-3Ⅱ、Beclin1等蛋白表达显著上调(P＜0.05),Bcl-2表达显著下调(P＜0.05).与ALA-PDT组比较,ALA-PDT+ 3-MA组细胞增殖活性、线粒体膜电位以及细胞自噬水平显著降低(P＜0.05),细胞凋亡水平显著提高(P＜0.05),Cleaved-caspase-3、Bax、胞质Cyt C等蛋白表达显著上调(P＜0.05),而Bcl-2、LC-3Ⅱ、Beclin1等蛋白表达显著下调(P＜0.05).结论 3-MA可通过抑制细胞自噬增强ALA-PDT对A431细胞产生的杀伤作用.
3-甲基腺嘌呤、ALA-PDT、皮肤鳞状细胞癌、凋亡、自噬
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R739.5(肿瘤学)
2020-06-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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