趋化因子受体基因CCR5人工miRNA的构建与功能分析

摘要：

目的 构建人工miR-CCR5,并研究其对HIV-1感染宿主细胞的影响.方法 以miR-155为基础骨架,根据HIV-1 CCR5基因序列设计并合成4对miRNA寡聚单链DNA,构建4个人工miR-CCR5.采用qPCR技术检测其对CCR5基因的沉默效率和对干扰素表达的影响;MTT法测定其对被转染细胞的毒性;抗HIV-1BaL感染实验检测其对HIV-1感染的抑制作用.结果 qPCR结果显示,4个人工miR-CCR5对CCR5基因都具有一定的沉默效果,其中miR-CCR5-4的沉默效率最高,达72％;且不会对细胞干扰素的表达产生影响.MTT实验证实miR-CCR5-4不会影响被转染细胞的活性,此外,病毒抑制实验显示,miR-CCR5-4对HIV-1BaL p24蛋白的抑制作用达70.48％,效果明显.结论 所获得的miR-CCR5-4可为进一步的抗HIV-1BaL感染研究提供基础.

关键词：HIV-1、CCR5基因、RNA干扰、人工miRNA

所属期刊栏目：31

分类号：Q786(基因工程（遗传工程）)

资助基金：湖南省自然科学基金重点项目09JJ3034

在线出版日期：2017-04-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：359-364