紫外线辐射前后HaCaT及人成纤维细胞分子伴侣蛋白质组的差异分析
目的 初步探讨紫外线辐射所致皮肤细胞分子伴侣蛋白质组整体变化规律.方法 分别提取30mJ/cm2UVB照射前后角质形成细胞HaCaT株和10J/cm2UVA照射前后成纤维细胞的总蛋白,采用固相pH梯度双向凝胶电泳技术进行分离,经Imaging Master 2D软件分析以发现差异表达蛋白,并对部分差异表达蛋白进行基质辅助激光解吸电离飞行时间(MALDI-TOF)质谱分析,测定其肽质量指纹图谱,在网上蛋白质数据库检索鉴定差异蛋白.采用Western免疫印迹法对部分质谱鉴定的差异蛋白做进一步验证.结果 获得良好的双向电泳图谱,图像分析显示在紫外线辐射前后很多蛋白质发生差异表达,对差异表达的部分蛋白点进行肽质量指纹图谱分析,经Mascot软件检索人非冗余蛋白质数据库后,在UVB辐射后角质形成细胞中鉴定出3个表达显著增加的分子伴侣蛋白:热休克蛋白70KDa 9B、热休克蛋白60KDa和PHB;在UVA辐射后成纤维细胞中鉴定出4个表达显著增加的分子伴侣蛋白:热休克蛋白70KDa A5、热休克蛋白70KDa9B、蛋白二硫键异构酶和PHB.Western免疫印迹法进一步验证上述结果.对这些蛋白的功能和与紫外线辐射的可能关系进行了初步探讨.结论 紫外线辐射可以诱导皮肤细胞分子伴侣蛋白质组发生改变,而这些蛋白的变化可能与皮肤细胞应对紫外线辐射并清除其损伤相关.
紫外线辐射、角质形成细胞、成纤维细胞、分子伴侣、蛋白质组学
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R392.12
国家自然科学基金;江苏省135重点资助项目
2009-06-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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